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PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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著(zhuó)色黴PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Fonsecaea spp.PCR |
YS-P014202 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避(bì)免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期:一年(nián)
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年,這是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下,產物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性(xìng),有明(míng)顯的(dí)指數擴增期,Ct值應小於等於(yú)35;
3. 以上要求需在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足,否則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn);對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一(yī)次(cì),若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期,則判(pàn)定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰性:無指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染(rǎn),樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降,可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性;
④靶基(jī)因的特異(yì)性與(yǔ)保守性。
著色黴(méi)PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性,使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進(jìn)行(háng),結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā),被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高的靶基因區(qū),其特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞;在病(bìng)毒的檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素(sù),無放射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如血(xiě)液,體腔(qiāng)液,洗嗽液(yè),毛(máo)發,細胞,活PCR技術(shù)概論。
