產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
弗(fú)氏(shì)檸(níng)檬酸(suān)杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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弗(fú)氏檸檬(méng)酸(suān)杆(gān)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Citrobacter freundiiPCR |
YS-P014019 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測部分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異性與保守性。
弗(fú)氏檸檬酸杆菌PCR檢測試劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴增的靶基因片段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳分析，不(bù)一定要用同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
