產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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中山(shān)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Chuzan VirusRTPCR |
YS-P014018 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有效期:一(yī)年
貨期:現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴增部分(fēn)的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的最高點。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯的指數擴(kuò)增期,Ct值應小於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足,否則該次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明顯(xiǎn)的指數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本;對於可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次,若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期,則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果;
2. 試劑運輸(shū),保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
中(zhōng)山病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng),使反應中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度下進行,結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加,被擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段也就能保持很高的正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成量是(shì)以指數方式(shì)增加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞中檢出一個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位);在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶,一(yī)次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu),即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素(sù),無放射性汙染,易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細菌及培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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