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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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猴型逆轉錄(lù)病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Simian TypeD Retrovirus(SRV)DPCR |
YS-P014752 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑則貯存於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一次(cì)實驗中同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
猴型(xíng)逆轉錄病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則的。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的(dí)特異性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增產物一般用(yòng)電泳分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需要分離病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概論。
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