產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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倍贊氏(shì)金蠅PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Chrysomya bezzianaPCR |
YS-P014017 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試劑配製不準確引起的試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能會導致出(chū)現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
倍贊氏金蠅PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳分析(xī)，不一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
