產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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腦膜炎敗(bài)血(xiě)金(jīn)黃(huáng)杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Chryseobacterium meningsepticumPCR |
YS-P014016 |
分(fēn)類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條件(jiàn):-20℃避光保存(cún),避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避(bì)光。
有效(xiào)期:一年
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫度下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下,產物(wù)檢測部分試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性,有明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本;對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次,若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,則判(pàn)定為陽性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙染,試劑汙染,樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸,保存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能下降,可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保守性。
腦膜炎(yán)敗血金黃(huáng)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物與模板的(dí)正確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性,使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進行(háng),結合的特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā),被擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基因區,其特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量是以指數方式(shì)增加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞;在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應,一(yī)般在2~4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分析,不(bù)一定要(yào)用同位素,無放射性汙(wū)染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血液(yè),體腔液,洗嗽(sòu)液,毛發,細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
