產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
帕(pà)臘南病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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帕(pà)臘(là)南(nán)病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Paranavirus(PARV)RTPCR |
YS-P014558 |
分類(lèi):PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫,避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期:一年
貨期(qī):現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般為1年,這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià),產物(wù)檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結(jié)果應為陽性(xìng),有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期,Ct值應(yīng)小於等(děng)於35;
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中同時滿足,否(fǒu)則該次實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn);對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一次(cì),若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī),則判定為陽性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng),可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性(xìng)。
帕臘南(nán)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性,使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以在(zài)較高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng),結合的(dí)特異性大大增(zēng)加,被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就能保持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應,一般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳分析,不一定要用(yòng)同位素,無放射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發,細(xì)胞,活PCR技(jì)術概論。
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