產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
阪崎(qí)腸杆菌rpsU-dnaG 基(jī)因間序列(bp)常規PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨號(hào) |
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阪(bǎn)崎(qí)腸杆菌rpsU-dnaG 基因間序列(liè)(bp)常規PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P014951 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議復核(hé)一(yī)次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降，可(kě)能會導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性(xìng)與保守性。
阪崎腸杆菌rpsU-dnaG 基(jī)因(yīn)間序列(bp)常(cháng)規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結合的特異性大大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將反應液加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
