產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
阪崎腸杆(gān)菌rpsU-dnaG 基(jī)因熒(yíng)光PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒間序列(liè)(探針法)
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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阪崎(qí)腸(cháng)杆(gān)菌(jūn)rpsU-dnaG 基因(yīn)熒(yíng)光PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)間序列(liè)(探針法(fǎ)) |
50T |
YS-P014952 |
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保存(cún),避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避(bì)光。
有效期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般(bān)為1年,這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足,否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次(cì),若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣品交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存不當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降,可能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。

②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
阪崎腸杆(gān)菌rpsU-dnaG 基因熒光PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒間(jiān)序(xù)列(liè)(探針(zhēn)法) 其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可(kě)以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng),結(jié)合的(dí)特異(yì)性大大增加,被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再通過選擇特異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區,其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火-延伸反應,一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要用同位(wèi)素,無(wú)放射(shè)性汙(wū)染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌及培養細(xì)胞,DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液,體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概論。
