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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
|
鼻(bí)病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P014953 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部分的試劑一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需在一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不當或試劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
鼻病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的正確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性和保守性高(gāo)的靶基因區，其特異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反應液加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求低(dī)
不(bù)需要分離病毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概(gài)論。
