產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
溶(róng)血(xiě)梭狀芽孢(bāo)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商品屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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溶(róng)血梭狀(zhuàng)芽孢(bāo)杆(gān)菌PCR檢測試劑(jì)盒 |
Clostridium haemolyticumPCR |
YS-P014031 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配製不準確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
溶(róng)血梭(suō)狀(zhuàng)芽孢(bāo)杆(gān)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及引物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同位素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨床標(biāo)本如(rú)血液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
