產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
鴨乙(yǐ)型(xíng)肝炎病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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鴨乙型肝炎病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Duck Hepatitis B Virus(DHBV)PCR |
YS-P014105 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避(bì)免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī):一(yī)年(nián)
貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年,這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì),若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性,否則判(pàn)定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現假陽(yáng)性結果;
2. 試劑(jì)運輸(shū),保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降,可能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
鴨乙型肝炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結合及引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加,被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和(hé)保守性高的靶基因區(qū),其(qí)特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí),能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細胞(bāo);在病(bìng)毒的檢測中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶,一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析,不一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液,洗嗽液,毛發,細胞,活(huó)PCR技術概論(lùn)。
