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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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恩杜姆病毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Ndumu VirusRTPCR |
YS-P014496 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本建議復核一次(cì)，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢測效能下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
恩(ēn)杜姆(mǔ)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的正確(què)結合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特異性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分離病毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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