產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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肝胰腺壞死(sǐ)性(xìng)細菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Necrotizing Hepatopancreatitis BacteriumPCR |
YS-P014497 |
分類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有效期:一(yī)年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物檢測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期,Ct值應小於等(děng)於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則該(gāi)次實驗視為無效。
2.可(kě)疑:有明顯(xiǎn)的指數擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑(yí)樣本;對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次,若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期(qī),則判定(dìng)為陽(yáng)性,否則判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染,試劑汙染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ);
2. 試劑運輸,保存不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng),可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
肝胰(yí)腺壞(huài)死(sǐ)性(xìng)細菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進行,結(jié)合的特異(yì)性大大增加(jiā),被擴增(zēng)的靶基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區,其特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式增加的(dí),能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個靶細胞;在(zài)病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi));在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù),無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低
不需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細胞,DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液,體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細胞,活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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