產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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內(nèi)羅畢(bì)羊病病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé) |
Nairobi Sheep Disease Virus(NSDV)RTPCR |
YS-P014495 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存(cún)，避免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測結果應為陽性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染，試劑汙染，樣品交叉汙染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引起的試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
內羅畢羊病病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒其中引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對原則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守性高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的純度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接(jiē)用臨(lín)床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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