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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
傳染(rǎn)性皮(pí)下和造(zào)血器官壞(huài)死病(bìng)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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傳染性皮下和造(zào)血(xiě)器官壞(huài)死(sǐ)病病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus(IHHNV)RTPCR |
YS-P014329 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫,避光。
有效期:一年
貨(huò)期:現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián),這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng),有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該次實驗視為(wéi)無效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì),若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,則判(pàn)定(dìng)為陽性,否(fǒu)則判定為陰性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng);
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
傳染性(xìng)皮(pí)下(xià)和(hé)造(zào)血器官壞死病病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性,使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行,結合(hé)的特異性大大(dà)增加,被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區,其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測模(mó)板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位);在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後,即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般在2~4 小時(shí)完成擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析,不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素,無放(fàng)射性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽液(yè),毛(máo)發(fā),細胞,活(huó)PCR技術概論。
