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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒

同(tóng)禽(qín)皰疹(zhěn)病(bìng)毒(dú)型雞傳染性喉氣管(guǎn)炎病毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé)

文(wén)字:[大][中][小] 2024-3-14    瀏覽次數:711    
商(shāng)品屬性
產品名(míng)稱(chēng) 英文名稱(chēng) 貨號(hào)
同(tóng)禽(qín)皰疹病(bìng)毒(dú)型(xíng)雞(jī)傳染性喉(hóu)氣管炎(yán)病毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV,1)PCR
YS-P014330
規格:50T
分類:PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年(nián)

貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一般為1年(nián),這(zhè)是指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存於-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。

【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 基綫(Baseline)設(shè)定:應(yīng)選擇(zé)該次(cì)實(shí)驗指(zhǐ)數(shù)擴增前所(suǒ)有樣(yàng)本熒(yíng)光信號比較(jiào)穩定的(dí)一段(duàn)區域(所有樣本熒光(guāng)信號(hào)無較大波動),起始(shǐ)點(Start)應(yīng)避(bì)開(kāi)熒(yíng)光采集起始(shǐ)階段的信號(hào)波動(dòng),終止點(diǎn)(End)應比最早(zǎo)出現指數擴(kuò)增(zēng)的樣(yàng)本(běn)Ct值(zhí)減(jiǎn)少(shǎo)1~3個循環,建(jiàn)議(yì)基(jī)綫設為(wéi)6~15。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正常陰(yīn)性質控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
1.   陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陰(yīn)性,無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct;
2.   陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng),有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35;
3.   以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
1.   陽(yáng)性(xìng):有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī),且(qiě)Ct<38;
2.可疑(yí):有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次,若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期,則判定(dìng)為陽性(xìng),否則判定為陰性;
3.   陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1.   實(shí)驗室環境汙染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);

2.   試(shì)劑運輸(shū),保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準確引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng),可能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。

PCR反應的特(tè)異(yì)性:
   ①引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)DNA特(tè)異(yì)正(zhèng)確(què)的(dí)結(jié)合;
   ②鹼基(jī)配對原則;
   ③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng);
   ④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性。
同禽皰疹(zhěn)病(bìng)毒型(xíng)雞(jī)傳染性(xìng)喉氣管(guǎn)炎病毒(dú)PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加(jiā),被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區,其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以指數方式(shì)增加的(dí),能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo);在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi));在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加好後,即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應,一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳分析(xī),不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位素(sù),無放射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接用臨床(chuáng)標本如血液,體腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液(yè),毛(máo)發,細胞,活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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