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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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登革熱病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015006 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在剛好超過(guò)正常陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結果應為陽(yáng)性，有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致出(chū)現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
登(dēng)革熱病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下進行，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通過選擇特異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
