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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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苛(kē)養(yǎng)木杆(gān)菌PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Xylella fastidiosaPCR |
YS-P014927 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
苛(kē)養(yǎng)木杆菌PCR檢測試劑盒其中引物與模板的正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通過選擇特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以指數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產物一般用電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不需要分離病毒或細(xì)菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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