產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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新疆(jiāng)出(chū)血(xiě)熱(rè)病毒PCR檢測試劑盒 |
Xinjiang Hemorrhagic Fever Virus(XHFV=CCHFV)RTPCR |
YS-P014926 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融。
【結(jié)果分析條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本建議復核一(yī)次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑配製(zhì)不準確(què)引起的(dí)試劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
新(xīn)疆出血(xiě)熱(rè)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合酶合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫度下進行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶基因區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一(yī)定要用(yòng)同位素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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