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PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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泰國利什曼原蟲PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Leishmania siamensisPCR |
YS-P014368 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙(wū)染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守性。
泰國(guó)利什曼原蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼基配對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復性)可以在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論。
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