產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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利什(shí)曼(màn)原蟲通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Leishmania spp.PCR |
YS-P014369 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產物檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守性。
利什曼原(yuán)蟲(chóng)通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物(wù)的結(jié)合(復性)可以在較(jiào)高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保守性高(gāo)的(dí)靶基因區，其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用電泳分析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要分離病(bìng)毒或細菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概論。
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