產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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佩氏(shì)著色(sè)黴(méi)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Fonsecaea pedrosoiPCR |
YS-P014201 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本；對於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則判定為陽性，否則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不當或試劑(jì)配製不(bù)準確(què)引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
佩氏著(zhuó)色黴PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模板的(dí)正確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結合的(dí)特異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退火-延伸反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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