產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
口蹄疫病毒(dú)亞型(xíng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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口(kǒu)蹄疫病毒亞型(xíng)PCR檢測試劑盒(hé) |
FootandMouth Disease Virus(FMDV)Asia1RTPCR |
YS-P014203 |
分類(lèi):PCR檢測試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件:-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún),避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效(xiào)期:一(yī)年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián),這是指在(zài)適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最(zuì)高點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本;對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì),若復核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),則判定(dìng)為陽(yáng)性,否則(zé)判定為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染,試劑(jì)汙染,樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性;
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保(bǎo)守性。
口(kǒu)蹄疫病(bìng)毒亞型PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模板的正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng),使反應中模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng),結合的(dí)特異(yì)性大大增(zēng)加(jiā),被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區(qū),其特異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的,能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一次性地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後(hòu),即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng),一(yī)般在2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電泳分析(xī),不(bù)一(yī)定要用(yòng)同位素,無放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液,體腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細胞,活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
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