產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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口(kǒu)蹄(tí)疫病毒(dú)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
FootandMouth Disease Virus(FMDV)RTPCR |
YS-P014204 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效期一般為1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守性。
口蹄疫(yì)病(bìng)毒通用(yòng)PCR檢測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模板的正確結合是(shì)關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要分離(lí)病毒或(huò)細菌及培養細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直(zhí)接用臨床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
