產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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豬布(bù)魯氏杆菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Brucella suisPCR |
YS-P013961 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
1. 陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應為陰性(xìng)，無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct；
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否則該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
1. 陽性：有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，且Ct＜38；
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
①引(yǐn)物與模板DNA特(tè)異正(zhèng)確的結合；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
豬布魯(lǔ)氏(shì)杆(gān)菌PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論。
