產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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肉芽(yá)腫鞘杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Calymmatobacterium granulomatisPCR |
YS-P013972 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光。
有效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨期(qī):現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一般(bān)為1年,這(zhè)是(shì)指在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下,產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng):將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯的指數擴增期,Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於可疑樣本建議復核(hé)一次(cì),若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),則判定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn),試(shì)劑汙(wū)染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng),可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性。
肉(ròu)芽(yá)腫鞘(qiào)杆菌PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性,使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下(xià)進行,結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增加,被擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保守性高的靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的,能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞;在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位);在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一(yī)般在2~4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電(diàn)泳分析(xī),不一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù),無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè),體腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液,毛發(fā),細胞,活PCR技術(shù)概論。
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