產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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駱(luò)駝痘(dòu)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Camel Pox Virus(CPVPCR |
YS-P013973 |
分類:PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸:低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴增期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於(yú)35;
3. 以上要求需在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對於可(kě)疑樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì),若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期,則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng),否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果;
2. 試劑(jì)運輸,保存(cún)不當或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降,可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶基因的特(tè)異性與保(bǎo)守性。
駱駝(tuó)痘(dòu)病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復性)可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng),結合的特(tè)異(yì)性大大增加(jiā),被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能保持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性高的靶基因(yīn)區,其特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒的檢測中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位);在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次(cì)性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後,即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應,一般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè),體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細胞,活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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