產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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豬薩(sà)佩羅病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Porcine Sapelovirus（PSV）RTPCR |
YS-P014624 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免反復凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯的指數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿足，否則(zé)該次實驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降，可能(néng)會導致出現假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與保守性。
豬薩(sà)佩羅病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫度下進行，結合的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病毒或細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
