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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
|
安氏(shì)毛圓綫蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
Trichostrongylus axeiPCR |
YS-P014869 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適當的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可能(néng)會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
安氏毛圓(yuán)綫(xiàn)蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片(piàn)段也就能保持很高的正(zhèng)確度。再(zài)通過選擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要用同(tóng)位素，無放射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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