產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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皺(zhòu)紋(wén)毛圓綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Trichostrongylus rugatusPCR |
YS-P014870 |
分類(lèi):PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫,避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年(nián)
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián),這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。

u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
2. 陽性質控品的檢測(cè)結果應(yīng)為陽性,有(yǒu)明顯的指數擴增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足(zú),否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本(běn);對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì),若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期,則(zé)判定為陽性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染,樣品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑運輸,保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效能下(xià)降,可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。

②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
皺紋(wén)毛圓(yuán)綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物與模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反應中模(mó)板與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進行,結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區,其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的,能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞;在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位);在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般在2~4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析,不(bù)一定要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù),無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
