產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
|
黃(huáng)杆菌通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
Flavobacterium spp.PCR |
YS-P014195 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下降，可能會(huì)導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
黃杆(gān)菌通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中引物與模板的(dí)正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將反應液加好後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定要用(yòng)同位素，無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
- 上(shàng)一條：腦(nǎo)膜炎黃杆菌PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
- 下(xià)一條(tiáo)：費蘭杜病毒(dú)PCR檢測試劑盒
