產品中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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腦膜(mó)炎黃杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Flavobacterium meningosepticumPCR |
YS-P014196 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定在剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現假陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守性。
腦膜(mó)炎黃(huáng)杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就能保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異(yì)性和保守性高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
