產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
|
蠶白僵(jiāng)菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P014961 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑(jì)一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否則該次(cì)實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
蠶白僵(jiāng)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結(jié)合的特(tè)異性大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
