產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
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布魯(lǔ)氏菌核(hé)酸(suān)熒光(guāng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)（探針法） |
50T |
YS-P014960 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準確(què)引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
布魯(lǔ)氏(shì)菌核(hé)酸(suān)熒(yíng)光(guāng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)（探針(zhēn)法）其中引物與(yǔ)模板的正確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以指數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢出一(yī)個靶細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī)，不一定要用同(tóng)位素，無放射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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