產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
|
巴(bā)西果仁PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P014946 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不當或試劑配製(zhì)不準確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保守性。
巴(bā)西果(guǒ)仁(rén)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物與模板的正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很高的(dí)正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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