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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)

犬皰(pào)疹病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒

文字(zì):[大][中(zhōng)][小] 2024-3-14    瀏(liú)覽次數:762    
商品(pǐn)屬性
產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱(chēng) 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 貨號
犬皰疹(zhěn)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
Canine Herpes Virus PCR
YS-P013985
規格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光保存(cún),避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸:低溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期:一(yī)年

貨期:現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年,這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。

【結(jié)果(guǒ)分析條件設(shè)定(dìng)】
u 基(jī)綫(xiàn)(Baseline)設定:應(yīng)選(xuǎn)擇該次實驗指數擴(kuò)增前所有樣本熒光(guāng)信(xìn)號比(bǐ)較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所(suǒ)有(yǒu)樣本(běn)熒光(guāng)信號(hào)無較大波(bō)動),起始(shǐ)點(Start)應避(bì)開(kāi)熒光采集(jí)起始階段的信號波動(dòng),終止(zhǐ)點(End)應比(bǐ)最(zuì)早出(chū)現(xiàn)指(zhǐ)數擴增的樣本Ct值(zhí)減(jiǎn)少(shǎo)1~3個(gè)循(xún)環,建議(yì)基綫設為(wéi)6~15。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫設定在剛好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
1.   陰性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陰性,無指數(shù)擴增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct;
2.   陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3.   以上(shàng)要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則該次實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
1.   陽性:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期,且Ct<38;
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為可(kě)疑樣(yàng)本;對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次(cì),若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性,否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性;
3.   陰(yīn)性:無指數擴增期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋】
1.   實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果;

2.   試劑(jì)運(yùn)輸,保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配製不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng),可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。

PCR反(fǎn)應的特異(yì)性:
   ①引物與(yǔ)模板DNA特異(yì)正確的結合;
   ②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé);
   ③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
   ④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
犬皰疹病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng),使反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行,結(jié)合的特異性(xìng)大大(dà)增加,被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很高的正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區,其(qí)特異性程(chéng)度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞;在(zài)病毒的檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後,即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素,無放射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗嗽(sòu)液,毛發(fā),細胞,活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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