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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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犬諾(nuò)瓦(wǎ)克(kè)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Canine Norovirus PCR |
YS-P013986 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一(yī)次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙染，樣品交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能下降，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
犬(quǎn)諾(nuò)瓦克病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正確(què)結合是關(guān)鍵。引物與模板的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應中模板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數(shù)方式增加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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