產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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山羊(yáng)皰(pào)疹病毒(dú)通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Caprine Herpesvirus（CpHV）PCR |
YS-P013994 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效期一般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對於可疑樣本建議復核一次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
山(shān)羊皰疹(zhěn)病(bìng)毒通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行，結(jié)合的特異性大(dà)大增加，被擴增的靶基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區(qū)，其特異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以(yǐ)指數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細胞；在病毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求低
不需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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