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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)

抗碳青黴烯肺(fèi)炎(yán)克雷(léi)伯(bó)菌PCR檢測試劑(jì)盒

文字(zì):[大][中][小] 2024-3-14    瀏(liú)覽(lǎn)次(cì)數:752    
商品屬性
產品名稱 英(yīng)文名稱(chēng) 貨號(hào)
抗(kàng)碳青(qīng)黴烯(xī)肺(fèi)炎(yán)克雷(léi)伯(bó)菌PCR檢測試劑(jì)盒
Carbapenemresistant Klebsiella pneumoniae(RKp)PCR
YS-P013996
規格(gé):50T
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免反復凍融。
運輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年

貨(huò)期(qī):現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下,產物檢測部分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍融。

【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 基綫(Baseline)設定:應選(xuǎn)擇(zé)該次(cì)實驗指數擴增前所(suǒ)有樣(yàng)本熒光信號(hào)比較穩定的(dí)一段區域(所(suǒ)有(yǒu)樣本熒(yíng)光(guāng)信號(hào)無較大波動),起(qǐ)始點(diǎn)(Start)應(yīng)避開(kāi)熒光(guāng)采(cǎi)集(jí)起(qǐ)始(shǐ)階(jiē)段的信號(hào)波動(dòng),終止(zhǐ)點(diǎn)(End)應比最(zuì)早(zǎo)出現(xiàn)指數(shù)擴增(zēng)的(dí)樣本(běn)Ct值減少1~3個(gè)循(xún)環(huán),建(jiàn)議基綫設為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
1.   陰性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陰性,無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct;
2.   陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性,有明顯的指數擴增(zēng)期(qī),Ct值應小(xiǎo)於等於35;
3.   以上要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
1.   陽性:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),且Ct<38;
2.可疑:有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可疑(yí)樣本;對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì),若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期,則判定為陽(yáng)性,否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3.   陰性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1.   實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙染,樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果;

2.   試劑運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降,可能會導致出現假陰性(xìng)結果。

PCR反應的(dí)特異性:
   ①引物(wù)與模(mó)板DNA特異正(zhèng)確(què)的(dí)結合;
   ②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則;
   ③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
   ④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
抗碳青(qīng)黴(méi)烯(xī)肺(fèi)炎(yán)克雷伯(bó)菌PCR檢測試劑盒其中引物(wù)與模板的正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結合(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng),結合的特(tè)異(yì)性大大增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因(yīn)片段也就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區,其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的,能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi));在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī),不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放射(shè)性汙(wū)染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液,體(tǐ)腔液(yè),洗嗽液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞,活PCR技(jì)術概論。
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