產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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基(jī)孔(kǒng)肯尼(ní)雅(yǎ)病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Chikungunya Virus(CHIKV)RTPCR |
YS-P014006 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避(bì)免反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守性。
基孔(kǒng)肯(kěn)尼(ní)雅病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則的。聚合酶合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高的溫(wēn)度下進行，結合的特異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保持很高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶基因區(qū)，其特異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性(xìng)地將反應液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反應。擴增(zēng)產物一般用電泳分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
