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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
雞(jī)傳(chuán)染性(xìng)貧(pín)血(xiě)病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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雞(jī)傳染(rǎn)性貧血病毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
Chicken Infectious Anemia Virus(CIAV)PCR |
YS-P014005 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試劑檢測(cè)效能下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
雞傳染(rǎn)性貧(pín)血病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與(yǔ)模板的結合及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下進行(háng)，結合(hé)的特異性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
