產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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鴿(gē)皰(pào)疹病毒型PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
Columbid Herpes Virus 1(CHV1)1PCR |
YS-P014046 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避光保存,避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有效(xiào)期:一年
貨(huò)期(qī):現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控品的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性,有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則(zé)該次實驗視為(wéi)無效。
2.可疑(yí):有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本;對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核(hé)一(yī)次,若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增(zēng)期,則判定為陽性,否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū),保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下(xià)降,可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
鴿(gē)皰疹病毒(dú)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使(shǐ)反應中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進行,結合的(dí)特異性(xìng)大大增加,被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量是以指(zhǐ)數方式增加的,能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞;在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一次性地將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分析(xī),不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素,無放射性(xìng)汙(wū)染,易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液,體腔液,洗嗽(sòu)液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞,活PCR技術(shù)概(gài)論。
