產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試(shì)劑盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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傳染(rǎn)性膿(nóng)皰(pào)皮(pí)炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Contagious Pustular Dermatitis Virus(CPDV )PCR |
YS-P014047 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸:低溫(wēn),避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī):一年(nián)
貨期(qī):現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下(xià),產物檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性,有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應(yīng)小於等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一次(cì),若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則判定為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染,試劑汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試劑(jì)運輸,保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製(zhì)不準確引起的(dí)試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降,可(kě)能會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與保(bǎo)守性。
傳(chuán)染性膿皰皮炎病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性,使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行,結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加,被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特異性和保守性高的(dí)靶基(jī)因區(qū),其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞;在病(bìng)毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶,一次性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退火-延伸反(fǎn)應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分析,不一(yī)定要用同(tóng)位素(sù),無放射性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液,體腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發,細(xì)胞,活PCR技術概論(lùn)。
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