產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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諾氏(shì)梭(suō)狀芽孢杆菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Clostridium novyiPCR |
YS-P014033 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增部分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測效能下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性(xìng)與保守性。
諾氏(shì)梭(suō)狀芽孢(bāo)杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫度下進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性大大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特(tè)異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反應液加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
