產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
產氣莢膜(mó)梭狀(zhuàng)芽孢(bāo)杆(gān)菌型PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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產(chǎn)氣(qì)莢(jiá)膜梭狀芽(yá)孢杆菌(jūn)型PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Clostridium perfringens types AAPCR |
YS-P014034 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本建議復核一(yī)次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配製不準確引起的試劑檢測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
產(chǎn)氣(qì)莢膜(mó)梭(suō)狀(zhuàng)芽孢(bāo)杆(gān)菌型PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結合及引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特(tè)異性大大增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指數(shù)方(fāng)式增加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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