產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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棒杆菌(jūn)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Corynebacterium spp.PCR |
YS-P014059 |
分類:PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條件:-20℃避光保存(cún),避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一年
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為(wéi)1年,這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物檢測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應為陽(yáng)性,有明顯的指數擴增期,Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足,否則(zé)該次(cì)實驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本(běn);對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次,若復核結(jié)果Ct<40且有指數擴增期(qī),則判(pàn)定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果;
2. 試劑(jì)運輸(shū),保存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降,可能會導致出現假陰性結果。
②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的忠實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性與保守性(xìng)。
棒(bàng)杆(gān)菌通用(yòng)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng),結合的(dí)特(tè)異性大大增加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū),其特(tè)異性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式增加的,能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi));在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次性地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好後,即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一(yī)般用電(diàn)泳分析,不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或(huò)細菌及培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血液,體腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細(xì)胞,活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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