產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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牛(niú)腎盂腎炎棒(bàng)杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
Corynebacterium renalePCR |
YS-P014058 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融。
運輸：低溫，避光。
有效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復核一次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下降，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
牛腎盂腎炎棒杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行，結合的特異(yì)性大大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能保持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再通過選擇特異性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細胞中檢出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要用同(tóng)位素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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