產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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假(jiǎ)結核棒杆(gān)菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Corynebacterium pseudotuberculosisPCR |
YS-P014057 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣本；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可能會導致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
假(jiǎ)結(jié)核(hé)棒杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確(què)結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板的結合(hé)及(jí)引物鏈的延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片(piàn)段也就能保持(chí)很高(gāo)的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分離病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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