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PCR檢測(cè)試劑盒
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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新(xīn)生(shēng)隱球(qiú)菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒 |
Cryptococcus neoformansPCR |
YS-P014070 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn):-20℃避(bì)光(guāng)保存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫,避光。
有效(xiào)期(qī):一(yī)年(nián)
貨期(qī):現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián),這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下,產物檢測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性,有明顯的指數(shù)擴增期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足(zú),否則該次實驗視為無效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣本;對於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì),若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期,則(zé)判定為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn),試劑(jì)汙染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試劑運輸(shū),保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下(xià)降,可能會導致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
新生隱球(qiú)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反應的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行(háng),結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加,被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇特異性和(hé)保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí),能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應(yīng)液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應,一(yī)般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分析(xī),不一(yī)定要用(yòng)同位素,無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn),易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低
不(bù)需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液,體腔液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
- 上一(yī)條(tiáo):貝(bèi)氏隱孢(bāo)子(zǐ)蟲PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
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